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| 編輯推薦： |
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1.介绍了我国大部分地区禽源大肠杆菌的分离鉴定；2.详细分析了大肠杆菌耐药性及其机制；3.介绍了猪和禽大肠杆菌病的临床症状和病例病变；4.深入阐述了大肠杆菌病各种检测和诊断技术；5.全面介绍了采用各种中药和西药防治大肠杆菌病的方法；6.介绍了大肠杆菌病的预防和控制措施。
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| 內容簡介： |
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本书主要介绍了大肠杆菌与人类健康、动物大肠杆菌的病原学、分离鉴定、耐药性、临床症状、病理剖检变化、诊断、致病机理以及药物治疗、疫苗研发应用等方面的研究进展和应用实践，重点论述了大肠杆菌致病因子、鸡和猪的主要大肠杆菌病感染和症状、中西医治疗和控制措施。本书可供兽医工作者、动物医学和相关专业专业师生、科研人员以及养殖户等参考使用。
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| 目錄：
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第一章大肠杆菌简介 1第一节大肠杆菌的理化特性1一、分类与形态1二、生长特性3三、生化特性4四、抵抗力4五、抗原性4第二节大肠杆菌与人体健康6第三节动物性食品源大肠杆菌8第四节动物性食品源大肠杆菌的检验12主要参考文献19第二章动物大肠杆菌的感染与分离鉴定 21第一节禽源大肠杆菌的分离鉴定21一、河南21二、河北22三、黑龙江23四、山东24五、西藏24六、湖南25七、云南25八、江苏26九、湖北26十、宁夏26十一、甘肃26十二、广东27十三、贵州27十四、重庆27十五、青海28十六、山西28十七、吉林28十八、天津28十九、辽宁29二十、浙江30二十一、四川30二十二、陕西31二十三、内蒙古32二十四、福建32第二节禽大肠杆菌的混合感染33一、支原体与大肠杆菌混合感染33二、新城疫混合大肠杆菌感染34三、传染性喉气管炎病毒混合大肠杆菌感染35四、传染性支气管炎病毒混合大肠杆菌感染35五、球虫与大肠杆菌混合感染36六、维生素E缺乏症并发大肠杆菌36七、新城疫与大肠杆菌、支原体混合感染37八、H9亚型禽流感病毒混合大肠杆菌感染37九、大肠杆菌混合沙门氏菌感染37十、大肠杆菌与葡萄球菌混合感染38十一、传染性法氏囊病混合大肠杆菌病39十二、马立克病混合大肠杆菌病感染39十三、网状内皮组织增生症继发大肠杆菌病39十四、鸡J亚群白血病继发大肠杆菌感染40十五、鸡传染性贫血继发大肠杆菌感染40十六、呼肠孤病毒病继发大肠杆菌感染40主要参考文献40第三章动物大肠杆菌的耐药性 43第一节药敏试验43一、纸片法43二、试管法48三、常量肉汤稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度49四、平板挖洞法50五、微量肉汤稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度51第二节禽大肠杆菌的耐药性调查54一、大肠杆菌的耐药机制54二、禽源大肠杆菌的耐药性55主要参考文献66第四章大肠杆菌的致病毒力因子 68第一节大肠杆菌的致病因子68一、菌毛69二、细菌毒素70第二节大肠杆菌毒力基因74主要参考文献75第五章大肠杆菌病的临床症状与病理病变 76第一节猪大肠杆菌病的临床症状与病理病变76一、仔猪黄痢76二、仔猪白痢78三、猪水肿病79第二节禽大肠杆菌病的临床症状与病理病变82主要参考文献90第六章大肠杆菌病的诊断 91第一节流行病学诊断91第二节实验室诊断的基本方法92一、病理组织学检查93二、微生物学诊断93三、血清学试验94第三节细菌的分离培养与鉴定94一、分离培养的注意事项94二、分离培养的方法95三、细菌的鉴定97第四节免疫酶技术112一、酶联免疫吸附试验Enzyme-linked imlunosorbentesesy，ELISA112二、斑点酶联免疫吸附试验Dot-ELISA114三、大肠杆菌菌体蛋白质残留量测定法115第五节聚合酶链反应检测技术116第六节实时荧光定量PCRReal-time quantitative PCR119一、iss基因119二、cva基因120三、cvaA基因120四、cvaB基因120五、cvaC基因121六、cvi基因121七、fimC基因121八、fimD基因121九、fimF基因122十、fimH基因122十一、fimG基因122十二、fimBfimD基因122十三、uxaA基因123十四、gntP基因123十五、stx2A亚基基因123十六、stx2 B亚基基因123十七、hlyE基因124十八、hlyC基因124十九、hlyA基因124二十、hlyB基因125二十一、hlyD基因125二十二、eae基因125二十三、eatA基因125二十四、eltA-不耐热性肠毒素A亚基126二十五、eltA-不耐热性肠毒素B亚基126二十六、toxA基因126二十七、toxB基因127二十八、aggA基因127二十九、aggB基因127三十、aggC基因127三十一、aggD基因128三十二、aggR基因128三十三、ipaA基因128三十四、ipaB基因129三十五、ipaC基因129三十六、ipaD基因129三十七、tccP基因129三十八、bfpA基因130三十九、bfpB基因130四十、bfpC基因130四十一、bfpD基因131四十二、bfpE基因131四十三、bfpF基因131四十四、bfpG基因131四十五、bfpH基因132四十六、bfpI基因132四十七、bfpJ基因132四十八、bfpK基因133四十九、bfpL基因133五十、bfpM基因133五十一、aafA基因133五十二、aap基因134五十三、shf基因134五十四、capU基因134五十五、virK基因135五十六、pic基因135五十七、cdt-IIIA基因135五十八、cdt-IIIB基因135五十九、cdt～IIIC基因136六十、astA基因136六十一、repI基因136六十二、papB～3基因136六十三、afaA基因137六十四、sfaH-3基因137六十五、virF基因137六十六、soxS基因138六十七、soxR基因138六十八、cadA基因138六十九、cadB基因138第七节环介导恒温扩增PCR法139第八节其他PCR技术140一、多重PCR技术140二、Tar916-shida PCR141三、随机扩增DNA多态性分型和随机引物PCR分型技术141四、低频限制性位点聚合酶链反应142五、多位点测序分型142六、细菌基因组重复序列PCR技术分型143七、PCR限制性片段长度多态性144八、扩增片段长度多态性144九、多位点数目可变串联重复序列指纹图谱分型145第九节免疫组织化学方法146一、免疫琼脂扩散法146二、乳胶凝集法146三、放射免疫法147第十节其他检测诊断技术147一、免疫印迹技术147二、质粒及质粒图谱分型148三、染色体DNA限制性酶切分析149四、色原或荧光底物及成套鉴定系统150五、核酸探针技术150六、核糖体分型151七、全细胞蛋白电泳图谱分型152八、高压脉冲场凝胶电泳分型152主要参考文献153第七章药物控制研究 154第一节大肠杆菌病西药防治研究154一、泵抑制剂154二、单硫酸卡那霉素155三、硫酸丁胺卡那霉素155四、硫酸阿米卡星156五、硫酸安普霉素156六、氟喹诺酮药物157七、单诺沙星158八、恩诺沙星乳酸盐158九、氟苯尼考159十、头孢拉定160十一、头孢噻呋钠162十二、喹赛多163十三、氧氟沙星164第二节大肠杆菌病中药防治研究165一、黄连、连翘、紫花地丁、黄芩和白头翁165二、银花、黄连、五味子、连翘、大黄、黄芩、黄柏、白头翁165三、板蓝根165四、苍术166五、车前子提取物167六、大蒜167七、诃子、五味子、五倍子、黄连、黄芩、苦参168八、低聚木糖168九、黄连169十、黄连解毒散169十一、黄芩浸出液170十二、苦参170十三、乌梅化合物V171十四、乌梅水煎液172第三节大肠杆菌病联合复方药物或联合用药防治研究173一、黄连组方口服液173二、连葛口服液174三、P10B抗菌肽和硫酸小檗碱174四、阿莫西林和硫酸黏菌素175五、肠安之星175六、天南星、重楼、黄连、郁金、夏枯草、金银花、黄柏、赤芍、川贝、甘草、栀子175七、复方氟苯尼考口服液176八、氟苯尼考与多西环素176九、氟苯尼考与三甲氧苄啶177十、复方制剂氟苯尼考-硫酸黏菌素可溶性粉177十一、复方白头翁颗粒177十二、复方白头翁散178十三、白头翁散+卡那霉素178十四、硫酸阿米卡星复方制剂179十五、复方磺胺二甲嘧啶钠179十六、复方盐酸恩诺沙星可溶性粉180十七、复方中草药超微粉180十八、复方中草药181十九、复方中药制剂A181二十、中草药复方制剂-科力182二十一、芩榆散183二十二、禽菌敌184二十三、舒安林184二十四、速效畜禽康复方烟酸诺氟沙星185二十五、细胞破壁中兽药健鸡散186二十六、泻康宁186二十七、有效微生物菌群187二十八、自拟中草药复方188二十九、中草药方剂188第四节大肠杆菌病其他药物防治研究189一、酵母培养物、糖萜素、益生素、甘露寡糖189二、重组抗菌肽CecropinB190三、抗菌脂肽提取物191四、生物活性肽191五、枯草芽孢杆菌E-8192六、乳酸菌及其培养物193七、乳酸菌发酵物与中药配伍194八、屎肠球菌195九、消毒药198十、五加糖肽198十一、增益素199主要参考文献201第八章动物大肠杆菌病的预防和控制 204第一节大肠杆菌疫苗研制204一、菌种的分离鉴定205二、疫苗菌株的筛选205三、大肠杆菌菌种候选菌株的传代205四、大肠杆菌菌种候选菌株的毒力稳定性测定205五、大肠杆菌病灭活疫苗基础菌种的研究206六、大肠杆菌病灭活疫苗的实验室制备206七、稳定性试验207八、大肠杆菌灭活疫苗的安全性试验207九、大肠杆菌病灭活疫苗对实验动物免疫效力208十、大肠杆菌病灭活疫苗效力检验的试验208十一、大肠杆菌病灭活疫苗的免疫期及抗体消长规律试验208十二、大肠杆菌母源抗体与试验动物免疫的相关性研究208十三、大肠杆菌病灭活疫苗的保存期试验209第二节禽大肠杆菌疫苗的研制与应用209第三节大肠杆菌相关疫苗研发与生产数据215一、已批准文号的大肠杆菌相关疫苗215二、国内新兽药注册的大肠杆菌相关疫苗219三、进口兽药注册的大肠杆菌相关疫苗220四、临床试验审批的大肠杆菌相关疫苗221第四节大肠杆菌防制措施221一、灭菌和消毒222二、定期免疫225三、定期预防投药225四、添加剂225五、治疗226六、加强监控226七、实行全进全出制227主要参考文献227后记 229
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肠杆菌科Enterobacteriaceae是一大群革兰氏阴性杆菌，根据细菌的生化反应、血清学试验和DNA同源性特征，可将肠杆菌科至少分为28个菌属和110个以上的菌种，包括腐生菌、寄生菌以及动物和人的病原菌。肠杆菌科细菌的分布十分广泛，除了少数存在于植物、水和土壤中等自然界中之外，绝大多数大肠杆菌科细菌是人和动物肠道正常菌群的重要成员。在肠杆菌科细菌中，沙门菌属、志贺菌属以及埃希氏菌属和耶尔森氏菌属的部分菌属对人或动物具有广泛、不同程度的致病性，在医学、公共卫生和兽医临诊上都有重要意义。大肠埃希氏菌Escherichia coli，E.coli是埃希氏菌属Escherichia中最重要的代表菌种，一般将大肠埃希氏菌称为大肠杆菌。德国科学家Escherich在1885年首次发现大肠杆菌，一般大肠杆菌不致病，并且随后长期以来一直被认为大肠杆菌属是人和动物肠道内正常菌群的重要成员之一，是人和动物肠道中的正常栖居细菌，维持着宿主肠道的正常生理功能。在一定条件下大肠杆菌可引起肠道外感染。在大肠杆菌属中，有一部分血清型大肠杆菌菌株的致病性强，可引起人和动物腹泻，统称致病大肠杆菌。大肠杆菌属于革兰氏阴性短杆菌，大小1～3微米×0.4～0.8微米。大肠杆菌周身有鞭毛，能运动，无芽孢，正常大肠杆菌菌属能发酵多种糖类产酸、产气。大肠杆菌是人和动物肠道中的正常栖居菌，自婴儿出生后大肠杆菌随哺乳进入肠道，与人终生相伴，大肠杆菌代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质菌群的生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，还能合成维生素B和维生素K，同时产生有杀菌作用的大肠杆菌素。大肠杆菌在正常栖居条件下不会使得动物或人发病，但若进入宿主胆囊、膀胱等器官后可引起炎症，大肠杆菌是兼性厌氧菌，在宿主肠道中可以大量繁殖，严重时大肠杆菌的量可以达到粪便干重的13。在不良的环境卫生情况下，常随粪便散布在周围环境中。如果在水和食品中检出一定比例的大肠杆菌，可认为是被粪便大肠杆菌污染的指标，从而确认有肠道病原菌的存在。因此，大肠菌群数或大肠菌值常作为饮水和食物或药物的卫生学标准指标之一。菌体抗原O、鞭毛抗原H和表面抗原K是大肠杆菌的抗原成分，这些复杂抗原成分具有抗机体吞噬和抗补体的能力。根据大肠杆菌菌体抗原的不同，可将大肠杆菌至少分为150多型，其中有一定数量的血清型属于致病性大肠杆菌，常引起流行性婴儿腹泻或成人胸膜炎。大肠杆菌可作为研究微生物遗传的重要材料，1954年在大肠杆菌K12菌株中发现的局限性转导的研究开创了肠杆菌可作为微生物研究工具的先河。莱德伯格Lederberg利用两株营养缺陷型大肠杆菌进行细菌接合实验，该实验奠定了大肠杆菌研究的基础，以及后期的基因工程研究。作为人和许多动物肠道中最主要且数量最多的一种细菌，大肠杆菌主要寄生在大肠内，不良条件下大肠杆菌侵入人体一些部位时，有些感染可能是致命性的，尤其是对孩子及老人。致病性大肠杆菌可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎、膀胱炎及腹泻等疾病。人在感染大肠杆菌后表现出胃痛、呕吐、腹泻和发热等临床症状。在自然界的水中大肠杆菌可存活数周乃至数月，同时相对于其他肠道杆菌，大肠杆菌对热的抵抗力比较强，55℃处理60分钟或者60℃灭活15分钟后仍有部分大肠杆菌存活，在温度较低的粪便中存活时间会更久。胆盐、煌绿等对大肠杆菌的生长表现出抑制作用。大肠杆菌的菌毛和肠毒素是大肠杆菌的主要致病物质，称为定居因子。此外，细菌胞壁脂多糖的类脂A具有毒性，大肠杆菌O特异多糖对宿主防御屏障具有抵抗作用。而大肠杆菌的K抗原有吞噬作用。自1894年大肠杆菌病被报道以来，21世纪随着养殖业的巨大发展，大肠杆菌病在各国流行日趋严重，并导致巨大的经济损失。大肠杆菌病主要由以下3种因素造成：1免疫抑制因素机体的免疫功能主要分为体液免疫和细胞免疫。当免疫系统受到其他疾病的破坏时，机体对其他疾病的抵抗力下降，大肠杆菌也就伺机入侵病体内。2大肠杆菌病的传播扩散主要受到环境因素影响气候突变、气温降低、通风不良、空气中氮气浓度过高等，都能诱使畜禽抵抗力减弱，机体被病原微生物入侵，从而感染大肠杆菌病。3大肠杆菌易产生耐药性大肠杆菌对氯霉素、链霉素以及磺胺类药物等表现出敏感，新霉素、庆大霉素也对大肠杆菌病有较好的临床治疗作用。但大肠杆菌极易产生耐药性，虽然大肠杆菌的耐药性机制不清楚，但大肠杆菌的耐药性主要是由带有R因子的质粒转移而获得的。临床流行病学资料显示，大肠杆菌对青链霉素、土霉素和四环素等抗菌药物具有较高的耐药性。在临床实际生产中，由于操作人员盲目使用抗菌药物治疗疾病、随意加大药物使用量或者低剂量长时间使用某种药物、未采用轮换用药的方法，使得大肠杆菌耐药性升高，导致药物疗效下降，造成不可挽回的损失。随意使用各种抗生素药物的同时也会导致畜禽体内微生物菌群失调，从而使宿主机体易感染大肠杆菌病。由于大肠杆菌血清学复杂，且地域差异较大，目前临床研究的大肠杆菌灭活菌体疫苗、脂多糖LPS疫苗、菌毛疫苗、鞭毛抗原H疫苗等对大肠杆菌病的防制效果不佳。因此，加强管理、搞好环境净化、加强营养、饲喂配合饲料、保持合理饲养密度、减少各种应激反应、加强消毒以及科学使用抗生素是大肠杆菌病的防制工作中的一些基本措施。针对耐药性的产生，研制出一种具有强烈、广泛、交叉免疫保护性疫苗，能更好地防治大肠杆菌的各种感染，而采用疫苗预防和中草药联合控制大肠杆菌病的是一种可探索的方式。外膜蛋白是大肠杆菌的一种高度保守序列，能标志大肠杆菌遗传多样性，用相同引物对不同大肠杆菌菌株的外膜蛋白A基因序列进行聚合酶链式反应扩增，能够产生完全相同的核苷酸序列。本书参考和借鉴了国内众多研究学者在人和动物大肠杆菌方面的报道文献，以及部分来自于网络的资料，在此，对文献的作者表示衷心的感谢。全书采用罗列、融合和分块整理方式，从动物大肠杆菌的病原学、分离鉴定、耐药性、临床症状、病理剖检变化、诊断、致病机理以及药物治疗、疫苗研发应用等方面的研究进展进行编写，重点论述大肠杆菌致病因子、鸡和猪的主要大肠杆菌病感染和症状、中西医治疗和控制措施，有助于临床上开展动物大肠杆菌病的全面防控。最后，谨希望本书的出版能够更多的科研工作者关注动物大肠杆菌感染。同时，因知识和能力有限，虽然做了最大的努力，本书仍然存在许多疏漏之处，望广大专家和读者批评指正。郭忠欣王梦艳刘兆阳 2019年4月10日
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