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植物发育生物学实验指南，系统阐述了植物发育学相关实验，既有模式植物水稻和拟南芥的实验，又有植物 DNA、RNA、蛋白质相关实验。本书可作为高等院校生命科学与生物技术专业本科生实验教材。
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| 內容簡介： |
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植物发育生物学实验指南，系统阐述了植物发育学相关实验，既有模式植物水稻和拟南芥的实验，又有植物 DNA、RNA、蛋白质相关实验。本书可作为高等院校生命科学与生物技术专业本科生实验教材。
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| 目錄：
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目录
第一章 模式植物的培养1
实验 1 模式植物的培养.1
实验 2 模式植物水稻的发育及结构特征.7
实验 3 模式植物拟南芥外观形态学和发育时期.12
实验 4 植物的Hela细胞悬浮细胞的培养和转化 15
实验 5 流式细胞仪在植物发育生物学研究中的应用.20
第二章 基于基因水平的研究24
实验 6 高质量 DNA的提取24
实验 7 热不对称交错 PCR扩增已知基因上游启动子序列.26
实验 8 -葡萄糖苷酸酶报告基因系统在植物发育生物学研究中的应用 30
实验 9 甲基敏感扩增多态性技术研究植物基因组甲基化模式.33
实验 10 实时荧光定量 PCR分析基因表达 .45
实验 11 RNA整体原位杂交检测基因的三维表达模式 .54
第三章 基于蛋白水平的研究67
实验 12 植物蛋白的原核表达与纯化.67
实验 13 利用家兔快速制备免疫多克隆抗血清.77
实验 14 利用苯酚提取植物总蛋白.83
实验 15 蛋白质的免疫印迹.86
实验 16 利用原生质体研究蛋白质的瞬时表达.93
实验 17 利用花粉管研究蛋白质的瞬时表达.98
实验 18 免疫化学法在植物组织切片中观察蛋白质的定位.102
第四章 植物发育生物学中的遗传转化107
实验 19 农杆菌介导的水稻快速转化.107
实验 20 农杆菌介导的玉米遗传转化.113
实验 21 农杆菌介导的拟南芥遗传转化花浸法.118
实验 22 农杆菌介导的烟草瞬时转化和稳定转化.121
实验 23 发根农杆菌介导的大豆转化和根发育的研究.125
实验 24 植物 CRISPRCas9基因组编辑技术129
实验 25 利用 CRISPRCas9基因编辑技术构建拟南芥未知功能基因敲除突变体134
第五章 花器官的发育研究139
实验 26 大小孢子及雌雄配子体的发育及形态特征观察.139
实验 27 花粉活力和柱头可授性检测.143
第六章 基本显微操作和植物制片技术146
实验 28 普通光学显微镜的构造及使用方法.146
实验 29 常用植物显微制片技术.149
附录 缩略词155
参考文献158
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| 內容試閱：
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前言
植物发育生物学是研究植物个体发育规律及其调控机理的学科，是发育生物学课程的重
要组成部分。发育生物学是一门实验科学，发展迅速。探索并实践适合本校学生基础和实
验条件，融合现代科学技术的发育生物学实验课可以使现代科技进步的成果渗透到传统的经
典课程内容之中，构建发育生物学实验课程教学新体系，从而激发学生的学习主动性，拓宽
并加深学生的知识面，培养学生的综合实验能力和创新能力。本实验指南提供了一系列实验
方法，很多都是植物发育生物学中常用的实验方法。涵盖了包括植物分子生物学、植物生理
学、植物组织工程、植物遗传操作、植物胚胎学等学科不同的实验操作与技能。材料部分详
细列出了每个实验所需的化学品、试剂、缓冲液和其他开展实验所需的必要材料。由于本实
验指南的目的是提供成功开展每个实验所需的全部和必要的操作步骤，因此方法部分尽可能
详细地叙述了每个步骤，目的是确保能成功获得实验结果。注释部分阐述了实验过程中可能
遇到的困难和最佳解决方法。本实验指南希望为大专院校的本科生和研究生的实验提供帮助
和指导。
本书的编写工作如下：实验 2由云南大学丁开宇编写；实验 9由西南林业大学张鹏远编
写；实验 10、实验 24、实验 25由东营职业学院陈壮壮编写；实验 26和实验 27由云南大学
廖菊够编写；实验 28和实验 29由云南大学申仕康编写；其余章节由云南大学代瑾然编写。
特别感谢云南大学陈穗云教授、叶辉教授和肖蘅教授为本实验指南的整体布局和修改提出指
导性意见；谢虹女士提供了相关图片；陈楚云女士协助绘图。
本实验指南入选云南省普通高等学校十二五规划教材建设项目；得到国家基金（J1103519、31660067）、云南省杰出青年培育项目（2018YDJQ027）的资助。在此，对于给予我们支持和帮助的单位和个人表示诚挚的谢意。由于时间和水平有限，书中不妥之处，敬请广大读者指正。
编 者 2019年 10月于云南大学
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